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色譜工作者都知道，在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時(shí)，不能有氣泡進(jìn)入系統(tǒng)，否則會(huì)出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動(dòng)不穩(wěn)定和基線噪音等問(wèn)題。通常對(duì)氣泡這種問(wèn)題，要預(yù)先進(jìn)行處理，如果等到氣泡進(jìn)入系統(tǒng)想要處理，可就不那么容易了。對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行提前過(guò)濾和脫氣處理，這是一個(gè)比較好的解決辦法。大家可能會(huì)想，我選擇實(shí)驗(yàn)分析的HPLC級(jí)溶劑還要過(guò)濾嘛？答案是：還是要過(guò)濾的！流動(dòng)相過(guò)濾可以選擇溶劑過(guò)濾器，過(guò)濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進(jìn)入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過(guò)濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì)，不會(huì)產(chǎn)生氣泡，...

無(wú)論氣相色譜還是液相色譜，我們最終用來(lái)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長(zhǎng)什么樣呢？它長(zhǎng)得如下圖所示，符合高斯分布的兩邊對(duì)稱(chēng)的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實(shí)驗(yàn)就好像買(mǎi)彩piao，不是每次都有理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)的。更多時(shí)候，總是會(huì)出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型，比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會(huì)出現(xiàn)這樣的情況呢？要針對(duì)不同的峰型來(lái)具體分析。比如峰拖尾，這是比較常見(jiàn)的峰型，可能有以下幾種原因：色譜柱如果受到污染，會(huì)導(dǎo)致柱效下降，影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染...

如果說(shuō)色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”，那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準(zhǔn)確性，與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類(lèi)有很多，主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無(wú)機(jī)填料。其中，硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應(yīng)用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢？硅膠基質(zhì)純度高，pH值通常在2-8之間，有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時(shí)還具有比較高的比表面積，高比表面積具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度；機(jī)械強(qiáng)度大，可以保證在...

一種新的研究方法的誕生，大多是為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問(wèn)題，但對(duì)極性和親水性化合物很少或無(wú)法保留保留。如果使用正相液相色譜法，用己脘或環(huán)已脘來(lái)分析這些物質(zhì)也存在一些局限性，很多極性和親水化合物往往很難溶解，從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上，誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜（HILIC）。在HILIC色譜柱上，物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反，在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì)，在通常的實(shí)驗(yàn)條件下，它們?cè)贖ILIC柱上有較強(qiáng)...

可以說(shuō)，色譜柱是色譜分析過(guò)程中最重要的部分，相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱，需要考慮不同參數(shù)將會(huì)造成什么影響，比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類(lèi)型，比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素，才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實(shí)驗(yàn)室條件來(lái)選擇適合的色譜柱。在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時(shí)，首先需要根據(jù)化合物的分子量大小，極性大小等因素選擇合適的分離模式，在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式...

色譜工作者都知道固定相的選擇對(duì)樣品的分離起著重要作用，不同類(lèi)型的色譜采用的固定相也是不同的，正相色譜采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相)，反相色譜一般用非極性固定相（如C18、C8），離子交換色譜中的固定相是各種離子交換劑等。早期使用*泛的是10-15μm固定相的填料，到今天HPLC的固定相已經(jīng)從不規(guī)則顆粒發(fā)展到球形顆粒。HPLC固定相發(fā)展歷程：六十年代，薄殼型填料，分離效率提高；七十年代，穩(wěn)定化學(xué)鍵合固定相，高速、高效和更大樣品容量，應(yīng)用范圍擴(kuò)充；八十年代，生物色...